Hemochromatóza - mutace H63D, S65C, C282Y HFE

Test hrazený ze ZP:
ANO
Indikující odbornost:
208
Test bez úhrady ZP:
ANO
Pohlaví:
Žena/Muž
Materiál:
Periferní krev, Bukální stěr …
Doba vyšetření:
3 týdny
STATIM:
3 dny

Materiál:

Periferní krev | 1x 3 ml plné krve v K3 EDTA zkumavce
Skladování po vyšetření: týden po vydání zprávy 2 – 8°C
Bukální stěr | 2x stěrová tyčinka pro odběr bukálního stěru
Skladování po vyšetření: týden po vydání zprávy 2 – 8°C
Izolovaná DNA z krve | 10-100 ng/μL izolované DNA z krve v PCR zkumavce o objemu min. 15 µl.
Skladování po vyšetření: skladuje se v archivu DNA bez omezení 15°C
Choriové klky | Choriové klky, min. 30 mg tkáně v mikrozkumavce (typ Eppendorf)
Skladování po vyšetření: týden po vydání zprávy 2 – 8°C
Plodová voda | 3x 10 ml plodové vody ve zkumavce
Skladování po vyšetření: týden po vydání zprávy 2 – 8°C
Pupečníková krev | 2-3ml pupečníkové krve v EDTA
Skladování po vyšetření: týden po vydání zprávy 2 – 8°C
Produkt koncepce | Tkáň plodu ve fyziologickém roztoku
Skladování po vyšetření: 1 alikvot se skladuje -25°C
Kultivované buňky | 1,5 ml kultiovovaných buněk v mikrozkumavce (typ Eppendorf)
Skladování po vyšetření: 180 dní 2 – 8°C
Izolovaná DNA z kordocentézy | 30-100ng/μL izolované DNA z kordocentézy v mikrozkumavce (typ Eppendorf)
Skladování po vyšetření: skladuje se v archivu DNA bez omezení 15°C
Izolovaná DNA ze choriových klků | 30-100ng/μL izolované DNA z choriových klků v mikrozkumavce (typ Eppendorf)
Skladování po vyšetření: skladuje se v archivu DNA bez omezení 15°C
Izolovaná DNA produktu koncepce | 50-100ng/μL v mikrozkumavce (typ Eppendorf)
Skladování po vyšetření: skladuje se v archivu DNA bez omezení 15°C
Izolovaná DNA z plodové vody | 30-100ng/μL izolované DNA z amniocentézy v mikrozkumavce (typ Eppendorf)
Skladování po vyšetření: skladuje se v archivu DNA bez omezení 15°C

Rychlý popis testu:

Vyšetření genu HFE pomocí Real-time PCR se provádí za účelem detekce nejčastějších mutací p.C282Y, p.H63D a p.S65C asociovaných s hereditální hemochromatózou.

Detailní informace o testu:

Gen HFE kóduje bílkovinu, která se váže na transferinový receptor (TFR), redukuje jeho afinitu (vazebnou sílu) pro železo-nesoucí transferi a tím reguluje akumulaci železa ve tkáni. Při deficitu HFE dochází k vysokému vstřebávání železa a jeho dlouhodobému střádání v játrech, kůži, slinivce břišní, žlázách s vnitřní sekrecí, kloubech a srdci s projevy choroby hereditární hemochromatózy. Příznaky hemochromatózy (únava, nevolnost, bolesti kloubů, snížení libida a plodnosti) se mohou dostavit mezi 30-50 rokem věku, častěji u mužů.

Střádání železa v játrech může vést k cirhóze a hepatocelulárnímu karcinomu. Střádání železa ve slinivce se může projevit diabetem II. typu s typickým zbarvením kůže (bronzový diabetes). Srdeční činnost může být nepravidelná (arytmie). Střádání železa se může projevit i v dalších orgánech (nervový systém, nadledvinky, podvěsek mozkový, ucho). Postižení hemochromatózou hůře snášejí některá infekční onemocnění. Při vzniku onemocnění se mohou uplatňovat mutace jiných modifikujících genů spolu s vlivy zevního prostředí. Proto pouze 23-25% nositelů významných mutací HFE genu mají příznaky hemochromatózy. Ženy v reprodukčním věku jsou pravidelnou menstruační ztrátou krve více chráněny před střádáním železa a příznaky hemochromatózy se u nich mohou projevit až v období menopauzy.

Nejčastější mutaci p.C282Y v heterozygotní podobě nese 8-10 % obyvatel západní, severní a střední Evropy. Další 2 mutace p.H63D a p.S65C se vyskytují méně často. Vyšetření  genu HFE se provádí za účelem detekce nejčastějších mutací (p.C282Y, p.H63D a p.S65C) metodou Real-time PCR. Tato metoda umožňuje monitorovat průběh reakce v libovolném okamžiku amplifikační reakce. Každý jednotlivý cyklus má shodné vlastnosti jako klasická PCR tj. denaturace dvouřetězové DNA, nasednutí primerů, extenze řetězce pomocí Taq DNA polymerasy. Při anelaci ovšem nasednou nejen příslušné primery, ale i sondy (specifické oligonukleotidové sekvence DNA) s fluorofory. Selektivita detekce je zajištěna specifickými sondami.

 

Indikace

klinické podezření na hemochromatózu (zvýšená sérová koncentrace železa, zvýšená koncentrace sérového feritinu, hepatomegalie, diabetes mellitus, kožní hyperpigmentace), prokázaná hemochromatóza nebo mutace genu HFE  u příbuzného

zpět na výpis